如何分析高效液相色谱图
发布于 2020-01-28 04:35:48
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高效液相色谱图分析要参考多方面因素。现在以液相色谱反相谱图C18，VWD检测器进行分析。1，出峰越靠前，说明物质极性越大，同时说明结构中含杂原子，极性键，比如羧基，氨基，等。2，峰响应值越高，说明有机物中共轭越多，有时物质已经带了颜色，进入可见区。3，峰型不好时，多是含双（多）基团，尤其是氨基酸类。4，根据PH调整看峰型，能基本判断PKA，有利于判断物质结构。5，多种条件分离都很困难时，并且峰型相似，一般多是两种或多种异构。6，通过出峰顺序可判断物质处理（如重结晶）所使用溶剂。7，波长与响应值对应，来判断可能结构。（相当于四大谱之一的紫外）
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拓展资料
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相关术语
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⊕色谱图(chromatogram)样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elution profile)。
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⊕基线(base line)流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。
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⊕噪音(noise)――基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
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⊕漂移(drift)基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。垍
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⊕色谱峰(peak)组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和脱尾峰(tailing peak ).前者少见。
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⊕拖尾因子(tailing factor,T)T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T<0.95为前延峰，T>1.05为拖尾峰。
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⊕峰底――基线上峰的起点至终点的距离。垍
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⊕峰高(Peak height,h)――峰的最高点至峰底的距离。
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⊕峰宽(peak width,W)峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ。
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⊕半峰宽(peak width at half-height,Wh/2)峰高一半处的峰宽。W h/2=2.355σ。
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⊕标准偏差(standard deviation, σ)正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高;反之，σ大，峰形胖、柱效低。
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⊕峰面积(peak area,A)――峰与峰底所包围的面积。A=×σ×h=2.507σh=1.064Wh/2h
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